4-hydroxy-2-nonenal as a marker of the oxidative stress in brains of dogs with canine distemper / 4-hidroxi-2-nonenal como marcador de estresse oxidativo no cérebro de cães com cinomose

Canine Distemper is a disease caused by Canine morbillivirus (CM), a pantropic virus that can affect the central nervous system (CNS), causing demyelination. However, the pathogenesis of this lesion remains to be clarified. Brain samples of 14 naturally infected dogs by CM were analyzed to evaluate the presence of oxidative stress and demyelination. RT-PCR assay was performed to confirm a diagnosis of canine distemper in the brain, immunohistochemistry anti-CM was used to localize the viral proteins in the tissue, and anti-4-hydroxy-2-nonenal (4-HNE) was a marker of a product of lipid peroxidation. The results showed the presence of viral proteins in the demyelinated area with the presence of 4-HNE. Our results suggest that the CM virus infection causes oxidative stress leading to lipid peroxidation, which causes tissue damage and demyelination. In conclusion, oxidative stress plays a significant role in canine distemper pathogenesis in the CNS.(AU)

A cinomose canina é uma doença causada pelo Morbilivírus canino (CM), um vírus pantrópico que pode afetar o sistema nervoso central (SNC), causando desmielinização. No entanto, a patogênese dessa lesão não está totalmente esclarecida. RT-PCR e imuno-histoquímica foram realizadas para confirmação do diagnóstico de cinomose em amostras de encéfalo de 14 cães naturalmente infectados. Após confirmação, foi realizada uma avaliação do estresse oxidativo por imuno-histoquímica com uso de anti-4-hidroxi-nonenal (4HNE) como marcador de produtos resultantes da peroxidação lipídica. Os resultados sugerem que a infecção pelo CM causa estresse oxidativo no tecido, levando a peroxidação lipídica, a qual causa danos ao tecido, culminando com desmielinização. Conclui-se que o estresse oxidativo tem papel importante na patogênese da cinomose canina no sistema nervoso central.(AU)

Puma (Puma concolor) predating sheep in Uberlândia, Brazil: physical injuries, stress and myopathy / Predação de ovelhas por onça-parda (Puma concolor) em Uberlândia, Brasil: lesões macroscópicas, estresse e miopatia

Puma (Puma concolor) is in Brazil among the major species involved in human-wildlife conflicts, primarily due to the predation of sheep and goats in farms. A puma might kill from one to several animals in a single predation episode, and free-ranging flocks of goats and sheep are usually affected. These attacks are rarely witnessed and direct observation of predation is rare. We herein report three predation episodes and the cause of death of sheep kept inside paddocks in a farm located besides a major town of Minas Gerais State, Brazil. Death of 31 animals was attributed to a puma as determined by circumstantial evidence, necropsy of 16 animals, laboratory findings and direct observation of the predator at the occurrence site. However, death of only eight animals was caused by traumatic injury mainly at the cervical region. The remaining animals lacked lethal traumatic injuries and post mortem examination indicated circulatory collapse (congestion of internal organs). Two surviving animals had a great increase in creatinine phosphokinase blood levels and thus death of remaining animals was attributed to stress and myopathy caused by fear and chasing of sheep trapped inside paddocks. Measures taken after the third predation episode (illumination of paddocks, pasture height control, vegetation clearance around the paddocks and closure of animals in stalls at night) prevented further attacks.

A onça-parda (Puma concolor) é uma das principais espécies relacionadas a conflitos entre humanos e animais selvagens no Brasil, principalmente devido predação de ovinos e caprinos em fazendas. Este felino selvagem pode matar de um a vários animais em um único episódio de predação, sendo geralmente, cabras e ovelhas criados extensivamente os mais afetados. Esses ataques raramente são testemunhados e por isso a observação direta da predação também é rara. Neste trabalho são relatados três episódios de predação e causa mortis de ovinos mantidos em piquetes em uma fazenda vizinha à Uberlândia, Minas Gerais, Brasil. A morte de 31 animais foi atribuída a uma onça-parda, conforme provas circunstanciais, exame necroscópico de 16 animais, achados laboratoriais e a observação direta do predador no local da ocorrência. Entretanto, a morte de apenas oito animais foi causada por lesão traumática, principalmente na região cervical. Os demais não apresentaram lesões traumáticas letais e nestes o exame post-mortem indicou colapso circulatório (congestão dos órgãos internos). Dois animais sobreviventes apresentaram acentuado aumento dos níveis sanguíneos de creatinina fosfoquinase, permitindo assim atribuir a morte dos demais animais ao estresse e miopatia provocadas pelo medo e perseguição das ovelhas dentro dos piquetes. Após o terceiro episódio de predação medidas preventivas foram adotadas e a iluminação dos piquetes, o controle da altura do capim nos piquetes, a redução da vegetação ao redor dos piquetes e a manutenção dos animais em baias fechadas durante a noite impediram novos episódios, pelo menos até o momento.

Correlation between systolic function and presence of myofibroblasts in doxorubicin-induced cardiomyopathy / Correlação entre função sistólica e presença de miofibroblastos na cardiomiopatia induzida pela doxorrubicina

ABSTRACT: Cardiotoxicity induced by doroxubicin generates systolic disfunction and myocardial remodeling with presence of myofibroblasts. These cells are thought to be attracted to the injured heart to avoid the development of congestive heart failure. The objective of this study was to evaluate the systolic dysfunction generated by doxorubicin through Doppler echocardiography, and its correlation with the presence of myofibroblasts in the myocardium. Twenty-five New Zealand White rabbits were divided into two groups (control, and treated with doxorubicin). The drug was administered for six weeks; Doppler echocardiography was performed before the first, and after the last administration of doxorubicin. Immuno detection of myofibroblasts was performed by immunohistochemistry. The treated group exhibited significant reduction in systolic function as assessed by Doppler echocardiography, and increased frequency of myofibroblasts, which were present in similar amounts in the left ventricle, interventricular septum, and right ventricle. There was a significant negative correlation between number of myofibroblasts in the interventricular septum and in the left ventricle with systolic function indices, which reveals that the higher the number of fibroblasts, the worst systolic function is in rabbits treated with doxorubicin. Increase in myofibroblast numbers was not sufficient to preserve systolic function.

RESUMO: A cardiotoxicidade induzida pela doxorrubicina gera disfunção sistólica e remodelamento miocárdico, com presença de miofibroblastos. Acredita-se que essas células sejam atraídas para a não evolução do quadro de insuficiência cardíaca congestiva. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a função sistólica gerada pela doxorrubicina por meio da ecodopplercadiografia e correlacioná-la com a presença de miofibroblastos no miocárdio. Foram utilizados 25 coelhos da raça Nova Zelândia, alocados em dois grupos (controle e tratados com doxorrubicina). O fármaco foi administrado por seis semanas e a ecodopplercardiografia foi realizada no momento zero e após a última administração da doxorrubicina. A imunodetecção dos miofibroblastos foi realizada por imuno-histoquímica. Houve redução significativa na função sistólica, observada na ecodopplercardiografia e aumento na imundetecção dos miofibroblastos nos animais tratados, na mesma intensidade no ventrículo esquerdo, septo interventricular e ventrículo direito. Houve correlação negativa significativa entre o número de miofibroblastos no septo interventricular e no ventrículo esquerdo com os índices de função sistólica, revelando que quanto mais miofibroblastos presentes, pior é a função sistólica de coelhos tratados com doxorrubicina. O aumento do número de miofibroblastos não foi suficiente para manutenção da função sistólica.

Ketorolac eye drops reduce inflammation and delay re-epithelization in response to corneal alkali burn in rabbits, without affecting iNOS or MMP-9 / Colírio de cetorolaco reduz inflamação e atrasa a epitelização em resposta a queimadura por álcali em coelhos, sem afetar iNOS ou MMP-9

Purposes: To assess the effects of 0.5% ketorolac tromethamine without preservatives on the expression of iNOS and MMP-9 in alkali burn ulcers. Methods: Twelve eyes of 120-day-old male rabbits were treated (TG) every 6 h with 0.5% ketorolac tromethamine and 12 other eyes were treated with saline solution (CG), immediately after the occurrence of ulcers by 1 M sodium hydroxide (NaOH). Re-epithelialization was monitored using fluorescein every 6 h. After 24 h, six corneas (n=6) of each group were collected (M1). The others (n=6) were collected after reepithelialization (M2). At both moments, the inflammatory infiltrate and the conditions of the newly formed epithelium were histologically analyzed. iNOS and MMP-9 were evaluated by immunohistochemistry. Results: Mean epithelialization time in TG was 55 ± 0.84 h. In CG, it was 44 ± 1.06 h (p=0.001). At M1, corneas of TG had lower inflammatory exudation compared with (p <0.001). At M2, TG revealed discrete inflammatory exudation (p>0.05) and lower numbers of epithelial layers compared with CG. The mean iNOS in stromal cells did not differ in TG over both moments compared with CG (p>0.05) At M2, the central corneal region expressed more iNOS in both groups compared with the peripheral region. No significant differences were observed in iNOS scores of epithelial immunostaining between the groups and across M1 and M2 (p=0.69). Epithelial immunostaining scores for MMP-9 did not differ in TG compared with CG (p=0.69). The average immunostaining score of MMP-9 in stromal cells showed no differences between groups or moments. There was no correlation between immunostaining of iNOS and MMP-9 or between the amount of inflammatory cells and immunostaining of iNOS. Conclusions: Use of 0.5% keratolac tromethamine reduced inflammation and delayed reepithelialization in a cornea alkali burn model without impacting the expression of iNOS or MMP-9. .

Objetivos: Avaliarem-se os efeitos do cetorolaco de trometamina 0,5%, sem conservante, sobre a expressão da iNOS e da MMP-9, em córneas com úlceras químicas. Métodos: Doze olhos de coelhos machos, 120 dias de idade, foram tratados (GT ), a cada 6 horas, com o cetorolaco de trometamina 0,5% e outros 12 com solução salina (GC), imediatamente à ocorrência de úlceras por hidróxido de sódio (NaOH) 1 mol/L. A reepitelização foi monitorada por fluresceína a cada seis horas. Decorridas 24 horas, seis córneas (n=6) de cada grupo foram colhidas (primeiro momento). As demais (n=6) o foram após a sua reepitelização (segundo momento). Em ambos os momentos, avaliaram-se o infiltrado inflamatório e as condições do epitélio neoformado (HE). Por imuno-histoquímica, avaliou-se a imunomarcação de iNOS e de MMP-9. Resultados: A média do tempo de epitelização no GT foi de 55 ± 0,84 horas. No GC, ela foi de 44 ± 1,06 horas (p=0,001). Às 24 horas, as córneas do GT apresentaram menor exsudação inflamatória (p<0,01). No segundo momento, o GT mostrou discreta exsudação inflamatória (p>0,05) e menor número de camadas epiteliais comparativamente ao GC. A média de imunomarcação de iNOS em células do estroma não diferiu do GT, em ambos os momentos (p>0,05). No segundo momento, a região central da córnea expressou mais iNOS, comparativamente à periférica, em ambos os grupos. Não se observaram diferenças significativas nos escores de imunomarcação epitelial de iNOS entre os grupos e os momentos (p=0,69). Os escores de imunomarcação epitelial para MMP-9 não diferiram entre os grupos (p=0,69). A média de imunomarcação da MMP-9 em células do estroma não exibiram diferenças entre os grupos e momentos da avaliação (p=0,32). Não houve correlação entre a imunomarcação de iNOS e de MMP-9, assim como quanto ao quantitativo de células inflamatórias e à imunomarcação de iNOS. Conclusões: Cetorolaco 0,5% reduziu a inflamação e atrasou a epitelização na queimadura corneal ...